MIRA DNR izoterminio greito amplifikacijos rinkinyje naudojama pažangi nukleorūgščių amplifikacijos technologija tiek kambario temperatūroje, tiek pastovioje temperatūroje (paprastai nuo 39ºC iki 42ºC). Padedant pagalbiniams baltymams ir vienos grandinės jungimosi baltymams, rekombinazė ir pradmenys sudaro kompleksą, kuris ieško ir jungiasi prie tikslinės homologijos domeno. Tai lemia D-kilpos regiono susidarymą homologinėje vietoje, pradedant mainus. Kai rekombinazė atsiriboja nuo komplekso, polimerazė jungiasi prie 3 'grunto galo, pradedant grandinės pratęsimo procesą. Be to, pasinaudodamas egzonukleazės aktyvumu, rinkinyje naudojami konkretūs šablonams skirtų molekuliniai zondai, leidžiantys realiu laiku stebėti tikslinio fragmento amplifikacijos procesą per fluorescencijos aptikimo įrangą.
【Savybės】
Didelis jautrumas
Komplektas siūlo puikų jautrumą ir specifiškumą nukleino rūgšties amplifikacijai.
Greito reakcijos laikas
Amplifikacijos procesas trunka tik 20 minučių, suteikiant greitus rezultatus.
Patogus saugojimas ir tvarkymas
Reakcijos komponentai yra sausų miltelių pavidalo, lengvai laikomi ir tvarkomi.
Platus suderinamumas
Suderinami su įvairiomis fluorescenciniais kiekybiniais PGR instrumentais, pastoviomis temperatūros fluorescencijos amplifikacijos sistemomis.
【Grunto dizainas】
Norint, kad optimalus našumas, pradmenys turėtų būti 30-35 bp ilgio. Trumpi pradmenys gali sumažinti amplifikacijos greitį ir aptikimo jautrumą. Gruntų dizainai turėtų vengti antrinių struktūrų, kurios galėtų trukdyti amplifikacijai. Rekomenduojamas amplicon ilgis yra 150-300 bp.
【Fluorescencinio zondo dizainas】
Fluorescencinis zondas neturėtų sutapti su konkrečia grunto atpažinimo vieta. Tai turėtų būti 46-52 nt ilgio, vengiant palindrominių sekų, vidinių antrinių struktūrų ir nuolatinių pakartotinių pagrindų. Zondo dizainas apima keturias modifikavimo vietas:
- A dpacer(Tetrahidrofuranas, THF) maždaug 30-35 nt iš 5 'galo, veikdamas kaip egzonukleazės atpažinimo vieta.
- A Fluorescencinė grupėyra paženklintas prieš THF svetainę.
- A gesinimo grupėyra pasroviui, 2-4 nt, išskyrus fluorescencinę grupę.
- 3 'zondo galas yra pažymėtas ablokuojanti grupė(pvz., aminų grupė, fosfato grupė arba c 3- tarpiklis), kai THF yra maždaug 15 nt atstumu nuo 3 'galo.
【Rinkinio kompozicija】
|
Compozicija |
COntentas |
|
Buferis |
1,6ml × 1Tube |
|
B buferis |
150 μl × 1Tube |
|
POSITIVE valdymo šablonas |
100 μl × 1Tube |
|
POSITIVE KONTROLĖzondas irgruntas MIx |
70 μl × 1Tube |
|
Reagentas |
48T |
|
Vadovas vadovas |
1Kopija |
【Pakavimo specifikacijos】
- Specifikacijos: 48 T/PACK
Populiarus Žymos: MIRA DNR izoterminė greito amplifikacijos rinkinio fluorescencija, Kinija Mira DNR izoterminė greito amplifikacijos rinkinio fluorescencijos gamintojai, tiekėjai
